21-09-2017@12:22:05 GMTنوحه ها و سروده‌های عاشورایی - سایت خبری تحلیلی تابناك|اخبار ایران و جهان|TABNAK دانلود نوحه شهروز حبیبی به نام سردار شایسته شمع حرم خانه دانلود نوحه به زبان شیرین ترکی پیگیری پرونده قضایی با کدملی و شماره پرونده | سامانه قوه قضاییه adliran.ir پیگیری الکترونیکی وضعیت پرونده قضایی در سامانه ثنا - بانک نمونه قراردادهای حقوقی پیگیری پرونده قضایی با شماره پرونده و کد ملی سامانه پیگیری، استعلام و مشاهده پرونده قضایی با کد ملی، اینترنت و پیامک دادگستری خوزستان khouznews ir پیگیری پرونده قضایی سایت قوه قضاییه عدل ایران ninjafun ir دانلود رایگان موبوگرام برای کامپیوتر - تلپدیا دانلود موبوگرام کامپیوتر|mobogram.exe | پی سی پلاس دانلود رایگان موبوگرام نسخه اندروید ورژن T4.2.1-M10.0 | پی سی پلاس اژدها وارد می شود و پس از کتک زدن همه خارج می شود! تنبیه بی رحمانه پسر بچه با شلاقی به نام شیلنگ + فیلم | رکنا سریال کره ای Sensory Couple(زوج حساس)8-5 - شبکه‌ما سریال زوج حساس قسمت 3-8 - شبکه‌ما گفتگو با زوج محبوب خبری: المیرا شریفی مقدم و داوود عابدی - دانلود آهنگ نامهربون از فتانه آلبوم گل و آتش | ویکی صدا دانلود آهنگ جدید مجتبی دربیدی خاتون دانلود آلبوم جدید شهروز حبیبی به نام پروانه های سوخته دانلود نوحه شهروز حبیبی سوسوز بالام اصغر دانلود آهنگ ترکی جدید شهروز حبیبی نام سوسوز بالام اصغر اخبار بازیگران ترک امراه پدر میشود! - زیباکده لحظه ای که بابک جهانبخش به زبان ترکی خواند و در سالن کنسرت تبریز غوغا به پا شد | تی وی پلاس اولین مجله ویدئویی ایران دانلود فیلم ترکی معجزه (Mucize ) با زیرنویس فارسی موسسه گاما جدیدترین فیلم های سینمایی دنیا اینجاست (46) بیوگرافی امراه خواننده ترکیه ای + تصاویر | هنر و هنرمند | کافه چی دانلود آهنگ Cevapsiz Cinlama از Aleyna Tilki + ترجمه - بُبت دانلود فیلم ترکی معجزه (Mucize ) با زیرنویس فارسی موسسه گاما بیوگرافی و عکسهای امراه خواننده مشهور ترکیه ای (9 عکس) - سرزه دانلود آهنگ سندی اهوازی - MusicWE - Download New Music راز شش گوشه بودن ضریح امام حسین(ع) / چند خاطره از ساخت ضریح جدید - خبرگزاری مهر | اخبار ایران و جهان | Mehr News Agency آزار جنسی دخترک 6ساله توسط راننده آژانس - ایسنا دانلود آهنگ تیتراژ پایانی برنامه زنده باد زندگی نقشه خوان صوتی فرش همراه (رایگان) فرش غریبی نقشه خوان صوتی فرش همراه (رایگان) فرش غریبی توصیه های یک زن قالی باف/ درآمد 800 هزار تومان تا 5 میلیونی قالیباف ها کارت پستال آغاز سال تحصیلی - مجله تصویر زندگی عکس و کارت پستال تبریک آغاز سال تحصیلی کارت پستال های زیبا برای سال تحصیلی جدید - پردیس سلامت آموزش ساخت کارت تبریک های فانتزی و آسان مجله اینترنتی بیلونه|پرتال خبری . تفریحی. سبک زندگی کارت پستال آغاز سال تحصیلی - مجله اینترنتی بیلونه|پرتال خبری . تفریحی. سبک زندگی کارت پستال های خوشگل برای سال تحصیلی جدید (17 عکس) - سرزه هوم کر - نحوه شرکت در قرعه کشی هوم کر مطالب شماره تلفن و ادرس دکتر رهام صادقی اعتراض عجیب تراکتوری‌ها به گوینده ورزشگاه هوم کر زمان ارسال کد قرعه کشی خرداد ماه مهلت شرکت با این روش‌ها لکه چسب را از روی اجسام و لباس‌ها پاک کنید چسب حرارتی را روی پارچه ساتن چگونه پاک کنیم از بین بردن چسب حرارتی روی لباس - http:www.google.com چگونه چسب را پاک کنیم/چگونه چسب 123را پاک کنیم/چگونه چسب را از روی لباس پاک کنیم - ساعت24 آینت | چند استفاده کاربردی از چسب حرارتی راه های از بین بردن تمام لکه ها اینجاست! ساخت انگشتر زیبا با چسب حرارتی - پرشین وی عاقبت نه چندان خوش ستارگان «نکست پرشین استار» دانلود آهنگ عروس البوم ترمه یاس آصف‎ دانلود آهنگ شادوماد طناز اینهمه نکن ناز می خوام از عبدل آباد پرده بخرم .راهنماییم کنید | تبادل نظر نی نی سایت دمادم | صفحه‌ی مورد نظر حذف شده است کجا پرده قیمت مناسب داره؟عبدل آباد داره؟ | تبادل نظر نی نی سایت زمان برگزاری آزمون مشاوران حقوقی ۹۶ + منابع آزمون - نی نای ثبت نام آزمون مشاوران حقوقی 96 - زمان ثبت آزمون وکالت دادگستری | آویژه دانش ثبت‌نام آزمون مشاوره حقوقی و وکالت مرکز وکلا و کارشناسان قوه قضائیه آغاز شد+ شرایط آزمون | خبرگزاری ایلنا زمان ثبت نام آزمون استخدامی مشاوره حقوقی و وکالت دادگستری در سال 96 -مجله استخدام کار 118 آغاز ثبت‌نام آزمون مرکز مشاوران قوه قضاییه مهلت ثبت نام آزمون وکالت و مشاوره حقوقی تمدید شد | رکنا فیلم مقطع دهم (ریاضی و تجربی) - Android Apps on Google Play دانلود موزیک ویدیو وای جونم وای دلبر سوگند دانلود آهنگ محلی شیرازی قدیمی از کورس سرهنگ زاده دانلود آهنگ جدید امید جهان ای جونم ای دلبر Download mp3: سوگند = ترانه ﺩِ ﻟُﻢ دانلود آهنگ نبض غم از سوگند ویکی صدا دانلود موزیک ویدیو دلم از سوگند به جای سخن سردبیر: در مورد نشریه تعلیم و تربیت استثنایی - Noor Specialized Journal Website مقالات نشریات و مطبوعات | علمی ـ اطلاع‌رسانی | ماهنامه تعلیم و تربیت استثنائی نحوه ارایه مطالب به نشریه تعلیم و تربیت استثنایی - پایگاه مجلات تخصصی نور تعلیم و تربیت استثنائی ـ شماره ۷۲، مهر و آبان ۱۳۸۶ ماهنامه تعليم و تربيت استثنايي انجمن راسخون - ماهنامه تعليم و تربيت استثنايي دانشگاه علوم و معارف قرآن كريم - سازمان اوقاف و امور خيريه - انجمن تخصصی کنکور اسامی خواهران برتر در سومین المپیاد قرآن و عترت دانشگاه علوم و معارف قرآن کریم اعلام شد ثبت نام در حوزه علمیه خواهران آغاز شد / پذیرش بدون آزمون کتبی - خبرگزاری مهر | اخبار ایران و جهان | Mehr News Agency اطلاعیه مراحل مصاحبه رشته‌های بورسیه و شرایط خاص - پایگاه خبری تحلیلی هراز نیوز حضور و غیاب علم و صنعت | کام رایان صبا ایرانیان آموزش گونی بافی روشنک حالا از قسمت سوراخ سوزن - زیباکده دانلود فیلم آنابل 2 (دوبله) (ترسناک) 2017 دانلود کتاب ابله داستایوفسکی ترجمه سروش حبیبی دانلود کتاب جنایت و مکافات اثر فیودور داستایفسکی دانلود ترجمه فارسی کتاب رمان ابله فئودور داستایوفسکی - ایرانی دیتا دانلود کتاب ابله اثر داستایوفسکی دانلود رمان بار دیگر دلدادگی برای موبایل و کامپیوتر/اندروید/تبلت/ایپد/ایفون Archives - نگاه دانلود رمان مژگان زارع Archives - نگاه دانلود دانلود آهنگ طبل و سنج بوشهری دانلود نوحه طبل و سنج ماشین فارسی 96 با لینک مستقیم - نوحه جدید دانلود اهنگ شاد بیکلام بندری با کیفیت عالی و لینک مستقیم دانلود نوحه طبل و دهل 96 / نوحه بیس دار شور - نوحه جدید دانلود آهنگ جدید علی عبدالمالکی به نام نشد دانلود نوحه های بی کلام با ریتم طبل و سنج روش درست کردن تخم مرغ در قالب کیک یزدی متن ترانه سویله گورو سن من اوچون نیندین فاكتور خام فروش خدمات و كالا | کارشناس ارشد فنی|مشاوره|ایزو|مدیربت|منابع انساني|مهندسي|نظارت|تاسیسات|مشهد دانلود مجموعه 4 فاکتور فروش بصورت لایه باز | پایگاه اینترنتی دی ال سل چاپ فاکتور خام|چاپ رسید چک در دفتر فنی غرب تهران صادقیه الزام صدور فاکتور رسمی برای فروش شیرخام به کارخانجات - خبرگزاری مهر | اخبار ایران و جهان | Mehr News Agency
این صفحه شما را به مطلب زیر هدایت می‌کند:

روش هاي تشخيص بيماري تيلريوز

برای مشاهده مطلب فوق، از لینک مقابل استفاده نمایید: روش هاي تشخيص بيماري تيلريوز
این مطلب در وبسایت dampezeshkan.com منتشر شده است و ‌«مجله ایرانی» در قبال آن هیچ مسئولیتی ندارد. بیشتر بدانید
با عنایت به اینکه سایت «مجله ایرانی» مصداق بستر مبادلات الکترونیکی متنی، صوتی و تصویر است، مسئولیت نقض حقوق تصریح شده مولفان از قبیل تکثیر، اجرا و توزیع و یا هر گونه محتوی خلاف قوانین کشور ایران بر عهده منبع خبر و کاربران است. (قانون تجارت الکترونیک)
علل از دست دادن حس بویایی چیست؟ با از دست دادن حس بویایی ( آنوسمی ) ممکن است شما خود را در وضعیت خطرناک قرار دهید به عنوان مثال، بدون توانایی تشخیص بو، شما ممکن است در وضعیت خطرناکی مانند نشت گاز، دود ناشی از آتش و غیره قرار گیرید. در ادامه به ذکر این علل پرداخته ایم. ختلالات طعم و بوی غذا هر...
توصیه هایی برای از بین رفتن نفخ شکم نفخ می تواند احساس ناراحتی در شما ایجاد کند و حتی باعث از بین رفتن اعتماد به نفس شما شود. چگونه می توانیم نفخ شکم را برطرف کنیم و با چه روش هایی این امر امکانپذیر خواهد بود توصیه های موثر در این زمینه را در ادامه مطلب برایتان آورده ایم اگر اغلب با این مشکل مواجه...
راهکاری برای کمتر غذا خوردن! اگر می خواهید کمتر بخورید،بهتر است حین غذا خوردن ساکت باشید، در این مطلب قصد داریم یکی از روش های جالب برای کمتر غذا خوردن را مطرح کنیم که ممکن است تا به حال نشنیده باشید. در ادامه بیشتر بخوانید: محققان بر اساس یکسری آزمایش ها دریافته اند که اگر هنگام غذا خوردن به صداهای جویدن، و...
طرز تهیه کیک ماکارونی با پنیر کیک ماکارونی و پنیر ایده جالبی است که می توان آن را شکل دیگری از مک اند چیز دانست. این بار ماکارونی و پنیر با مقداری کالباس بیکن و پیاز سرخ شده مخلوط می شوند و در قالب فلزی به شکل کیک پخته می شوند. چیزی که بیشتر از همه طعم کیک ماکارونی و پنیر را تعیین می...
نشانه های اعتماد به نفس پایین و راهکارهای مبارزه با آن! آیا تا به حال فردی را دیده اید که جمله ای را به زبان بیاورد و بلافاصله بارها بابت گفتن آن عذرخواهی کند؟ چنین افرادی بدون شک دچار کمبود اعتماد به نفس هستند. بعضی از جملاتی که به زبان می آورید درجه اعتماد به نفس تان را نشان می دهند. بعضی افراد باورشان این است که هر مشکل...
مصرف مداوم کله پاچه خطرناک است! بسیاری از بیماری های دوران میانسالی و سالمندی نشات گرفته از الگوهای غلط غذایی در دوران جوانی است، بنابراین جوانان و افراد سالم به صرف این که از سلامت کافی برخوردارند، نباید با خوردن افراطی کله پاچه زمینه ابتلا به بیماری های مختلف را در آینده فراهم کنند. مکتوب زیر توصیه های پزشکی دکتر کوروش جعفریان متخصص تغذیه...
ماست سنتی بهتر است یا صنعتی؟ مقابل یخچال لبنیات فروشگاه که بایستید هزار و یک جور محصول جدید می بینید.کم چرب، پرچرب، غنی شده، بدون لاکتوز، پروبیوتیک و.... اما آیا این همه اسم فقط برای تجارت و بالارفتن فروش است یا واقعا دنیای لبنیات آنقدر گسترده شده که هر روز محصولی با ویژگی های جدید از راه می رسد؟ در مکتوب زیر به بررسی...
چطور سطح انرژِی روزانه را افزایش دهیم؟ اگر گمان می کنید خستگی شما در طول روز، مزمن و بیش از حد است به پزشک مراجعه کنید. اما این را بدانید که بیشترین علل مربوط به خستگی های روزانه ناشی از رژیم های غلط غذایی است. اما خبر خوب این است که استفاده از موادغذایی طبیعی انرژی زا این روند را می تواند کاملا معکوس کند....
آیا مصرف تخم مرغ در بارداری مضر است؟ مصرف تخم مرغ در زمان بارداری به میزان روزی یک عدد توصیه می شود و هیچ خطری از نظر ایجاد ورم و تولید آلبومین در ادرار ندارد. بنابراین غذای بسیار مناسبی برای مادر و جنین به شمار می آید. مکتوب زیر توصیه های پزشکی دکتر الهام السادات هاشمیان جراح و متخصص زنان است درباره تغیه زنان در بارداری....
طرز تهیه سالاد مرغ رژیمی با کاری سالاد مرغ کاری یکی از آسانترین غذاهایی است که می توانید تهیه کنید و در یخچال نگه دارید. می توانید سالاد مرغ را به عنوان شامی سالم و مقوی میل کنید. چون به جای سس مایونز از ماست یونانی استفاده شده سالاد کم چربی است. همین طور می توانید شب سالاد مرغ را تهیه کنید و صبح روز...
تبلیغات متنی
21-09-2017@12:22:05 GMT
 روش هاي تشخيص بيماري تيلريوز جستجو Sign in Welcome! Log into your account your username your password Password recovery Recover your password your email A password will be e-mailed to you. علوم آزمایشگاهی انگل شناسی روش هاي تشخيص بيماري تيلريوز روش هاي تشخيص بيماري تيلريوز

روش هاي تشخيص بيماري تيلريوز شامل وجود پادتن بصورت غير مستقيم ، تهيه اسلايد حاوي آنتي ژن پيروپلاسم ، روش كار براي تشخيص آنتي بادي فلورسانس می باشد.

تيلريا انگل تك ياخته أي اجباري داخل سلولي تمام خانواده گاوهاي وحشي و اهلي ( Bovidae ) در جهان ميباشد. و بعضي از گونه ها نشخواركنندگان كوچك را نيز مبتلا مي نمايد. بوسيله كنه هاي خانواده Ixodidae منتقل ميشوند و داراي زندگي پيچيده اي در مهره داران و بي مهره ها ميباشند. شش گونه تيلريا گاو را آلوده ميكند كه دو تا از آنها بيماري زايي بيشتري دارند : اولي بنامT. parva كه بيماري East coast fever , Corridor disease , Zimbabwean theileriosis را ايجاد و دومي T. annulata باعث بيماري Tropical theileriosis ميشود.

ديگر گونه ها كه شامل T. sergenti, T. buffeli, T. orientalis, T. taurotragi, T. mutans هستند معمولا بيماري زايي خفيفي ايجاد ميكنند. گونه T. velifera غير بيماري زا است. اغلب اين گونه ها پس آلوده كردن دام ايجاد دام ناقل در دامهاي بهبود يافته را مينمايند اما هيچ نوع داده وآماري در رابطه با رل اين ناقلين در انتقال بيماري در حالت طبيعي وجود ندارد.

گاوهاي بومي درمناطق بومي آلوده ممكن است بيماري را تحمل نموده و يا به بيماري خفيف و تحت كلينيكي مبتلا شوند. اما گاوهاي غير بومي حسا س بوده و در صورت ابتلا علائم شديدي نشان داده و يا تلف مي شوند.

همانطوريكه قبلا هم گفته شد شيزونت ها در گسترش تهيه شده از غدد لنفاوي مشخصه خوبي براي آلودگي با T. parva, T. annulata ميباشد. شيزونت گونه T. taurotragi در گسترش رنگ آميزي شده بوسيله گيمسا بخوبي قابل تشخيص نميباشد.

شيزونت T.mutans نسبت به شيزونت T. parva داراي هسته هاي بزرگتر، مسطح وبي قاعده ميباشد.

فرم پيروپلاسمي T. parva , T. annulata و T. mutans شبيه بهم ميباشد. اما معمولا T. annulata , T. mutans بزرگتر و اغلب در حال تقسيم ديده ميشود. T. velifera ممكن است بوسيله يك پرده حجاب مانند تشخيص داده شود.

تشخيص سرولوژيكي :

تشخيص وجود پادتن بصورت غير مستقيم بوسيله IFA ( indirect fluorescent antibody)
بطور گسترده براي تشخيص گونه هاي مختلف تيلريا بكار مي رود. تشخيص نوع آلودگي بخصوص آلودگي با  T. parva چندان در بين روشهاي ايمنولوژي قابل تمايز نمي باشد. بهترين روش سرولوژي قابل تمايز مابين گونه هاي تيلريا آزمايش غير مستقيم پادتن فلورسانس IFA ( Indirect Fluorescent Antibody ) مي باشد. در اين آزمايش هر دو مرحله شيزونت و پيروپلاسمي بوسيله لام تهيه شده و يا در محلول قابل بررسي مي باشند. براي نگهداري محلول يا لامهاي تهيه شده در مرحله شيزونتي دماي انجماد (20- تا 70- ) استفاده ميشود ولي در مرحله پيروپلاسمي براي نگهداري محلول از دماي 4 درجه يخچال و براي لامها از دماي انجماد ميتوان استفاده كرد.

سرمهاي مورد آزمايش را با ماده bovine lymphocyte lysate رقيق ميكنند و با محلول آنتي ژني در انكوباتور ميگذارند و بعد ضد ايمنوگلوبولين متصل گاوي anti-bovine immunoglubolin conjugate افزوده مي شود.

الف- تهيه لام يا اسلايد آنتي ژن شيزونت

آنتي ژن مورد استفاده براي schizont IFA test ازتيره سلولي شيزونت ليمفوبلاستوئيد Lymphoblastoid گرفته ميشود. كشتهاي سلولي را كه داراي رقت 200 ميلي ليتر شيزونت در يك ليتر شيزونت هاي آلوده ( به T. parva ويا T. annulata بوده و حاوي ده ميليون سلول در هر ميلي ليتر و حداقل 90% سلولها آلوده ميباشند ) باشد را سانتريفيوژ كرده ( بمدت 20 دقيقه در سرعت 200 دور در دقيقه در دماي 4 درجه ) و مايع روئي را دور ريخته و سلولهاي ته نشين شده را با 100 ميلي ليتر بافر ( Phosphate buffered saline) PBS در دماي 4 درجه و pH 7.2 تا 7.4 مخلوط و دوباره سانتريفيوژ ميكنيم. اين روش شستشو را سه بار تكرار كرده و در آخرين با رسلولهاي ته نشين شده را با 100 ميلي ليتر PBS مخلوط كرده تا غلظت نهائي حدودCELL/ML 7 10 درآيد.

گسترش نازك از محلول سلولي را روي اسلايد حفره دار ( از جنس تفلن ) تهيه كرده ويا روي لام معمولي را با استفاده از لاك ناخن تقسيم كنيم . هر گسترش بايد داراي 50 تا 80 سلول سالم در هر ديد ميكروسكوپي Field  باشد ( وقتيكه با بزرگنمايي 40 با روغن Immersion بررسي شود) .بوسيله پي پت 100μl آنتي ژنها را با مكش يكدفعه روي لام ريخته كه پس از توزيع محلول شيزنت يا پيروپلاسم يك لايه Monolayer در هر كدام باقي مي ماند. اينكار را براي هر حفره انجام داده تا مايع تمام شود. بااين روش تقريبا“ مي توان 600لام با كيفيت خوب كه حاوي 6 هزار سلول در هر نقطه آنتي ژن باشد بدست آورد . گسترشها را درمعرض هوا خشك كرده ودراستن بمدت ده دقيقه ثابت كرده ( Fixation)  وبطور جداگانه دردستمال كاغذي پيچيده و سپس در كاغذ آلومينيم ( فويل آلومينيم  )  وبعد در محفظه ضد آب و هوا دردماي20- درجه سانتيگراديا 70 – درجه سانتيگراد نگه مي داريم . دردماي –20 درجه سانتيگراد بمدت يكسال قابل استفاده هستند ودردرماي –70 درجه سانتيگراد بمدت طولاني تر ( دردماي يخچال 4 درجه سانتيگراد بمدت چهارماه قابل نگهداري هستند).

ب- محلول آنتي ژن شيزونت

ابتدا 500 ميلي ليتر از محلول T.annalataيا T. parva سلولهاي آلوده با غلظت 10 6cell/ml سلول سانترفيوژكرده ( در 150 g دور دردقيقه براي ده دقيقه در دماي 4 درجه )  وسلولهاي ته نشين شده در100سي سيPBS سرد دوبار شستشو مي دهيم.

قابليت زنده بودن سلولها را بوسيله اوزين Eosin يا Trypan blue بررسي ميشود ( كه بايد بيش از %90 باشد ) محلول سلولها بايد درمحلول سرم فيريولوژي سرد رقيق شود تا غلظت 7 10سلول (/ml Cell) بدست آيد دراين حجم ،  دوبرابرآن را محلول سرد شده حاوي 80%  استن و 0.1 % فرمالين در PBS قطره قطره اضافه كرده ( در درماي –20 درجه ) تا درمدت 24 ساعت به تثبيت رسد.

سلولهاي ثابت شده را سه بار شستشو داده ( در سرم فيولوژي سرد شده دردماي 4 درجه ) و در 200 دور دردقيقه بمدت 20 دقيقه سانترفيوژ ميكنيم. بعد از آخرين شتشو سلولهاي ته نشين شده را در سرم فيولوژي رقيق كرده تا غلظت 107/ml بدست آيد . بميزان 5/0 سي سي سلولهاي ثابت شده را جدا جدا برداشت و تقسيم مي كنيم .

تهيه اسلايد حاوي آنتي ژن پيروپلاسم:

مرحله پيرپلاسمي گونه هاي تيلريا را نمي توان دركشت سلول نگهداري يا تهيه نمايند. زيرا آنتي ژن پيروپلاسمي بايد از حيوانات زنده آلوده تهيه شود و عفونتهاي تجربي بوسيله تزريق زير پوستي با اسپروزئيت يا كنه هاي آلوده باT.parva T.taurotragi ,T.annulata , صورت ميگيرد. آلودگي گروه انگلي T.sergenti/ T.buffeli/ T.orientalis ,T.mutans or T.velifera بوسيله تزريق داخل رگي خون حيوان ناقل به گاو يا گوساله طحال برداشته و يا تماس با كنه آلوده ايجاد مي شود. وقتيكه آلودگي پيروپلاسمي بيش از 5%  باشد، صد ميلي ليتر خون آلوده آغشته با مواد ضد انعقاد را بخوبي با PBS مخلوط مي كنيم . اين مخلوط را سانترفيوژ كرده ( با500دور در دقيقه براي ده دقيقه)  و بعدپلاسما و Buffy Coat را جدا كرده و RBC هاي باقي مانده را بادوليتر PBS رقيق مي كنيم. سپس دوباره سانترفيوژ كرده وهمينطور Buffy coat را جدا ميكنيم . اين عمل رابراي چهار بار تكرار مي كنيم و بعد از پنجمين ششتشو، مقداري از RBC هاي جمع شده Packed RBC را با PBS مخلوط كرده واز آن 5μl روي هر اسلايد مي گذاريم. نقاط خشك شده را با متانول تثبيت كرده وبا رنگ آميزي گيمسا رنگ ميكنيم ونهايتا زيرميكروسكوپ نوري بررسي مي كنيم . تقريبا ده هزار اسلايد آنتي ژني ( صد هزار نقاط آنتي ژن ) ا ز100سي سي خون آلوده  تهيه مي شود. اسميرهاي آنتي ژني را در دماي اتاق خشك كرده وبعد در دماي 4 سانتيگراد درجه در استن بمدت ده دقيقه فيكس ميكنيم. اسميرهاي فيكس شده شبيه اسلايدهاي آنتي ژني شيزونت نگهداري ميشوند.

محلول يا سوسپانسيون حاوي پيروپلاسم : 

يك روش تهيه آنتي ژن براي T.parva قبلا“ شرح داده شد دراين روش صد ميلي ليتر از خون حيوانيكه شديدا“  در مرحله آلودگي پيروپلاسمي باشد گرفته و مانند آنچه شرح داده شد،گلبولهاي قرمز تجمع كرده را به PBS اضافه كرده تا محلول 5%  بدست آيد.- در مراحل فوق بايد آنتي ژن را استانداردكرد-

تهيه lysate Bovine Lymphocyte : اين ماده طبق روش Godderis et al. براي بررسي محلول آنتي ژن T. parva بكار مي رود . ابتدا يك گوساله سه ماهه كه طحال آنرا برداشته اند را درنظر گرفته و واز طريق تماس با كنه و يا پشه تسه تسهtse Tse آلوده مي كنيم وروزانه بمدت چهارهفته با رنگ آميزي گيمسا بررسي ميكنيم . نهايتا بعد از مرگ يا كشتن حيوان از تيموس و غددلنفاوي نمونه برداري مي كنيم .

بافتها را به قطعات كوچكتر تقسيم كرده ودر PBS سرد ( در دماي 4 درجه) بهمراه %45 /.0 مواد ضد انعقاد نگهداري ميكنيم . سلولها را از بافت بوسيله پارچه MUSLIN جدا كرده و سه بارشتشو با مخلوط PBS-EDTA ميدهيم و در دور 200 بمدت 20 دقيقه در دماي 4 درجه سانتريفيوژ ميكنيم . لينفوسيتهاي شسته شده را با PBS كه عاري از EDTA باشد، مخلوط مي كنيم تا غلظت نهائي CELL/ML 107*5 بدست آيد .

روش كار براي تشخيص آنتي بادي فلورسانس : 

اسلايد شيزونت يا پيروپلاسم را از دماي انجماد، 20- درجه سانتيگراد در آورده و بمدت 30 دقيقه در دماي يخچال، 4 درجه گذاشته و سپس 30 دقيقه ديگر در دماي اتاق ميگذاريم.

بوسيله پي پت پاستور 100/μl آنتي ژن را روي هر لام ريخته ودردماي اتاق 37 درجه خشك مي كنيم . ميتوان براي تلعلع بهتر وديد بهتر از Evansblue نيزبهمراه رنگ فلورسانس استفاده كرد و بعد در گلسيرول 50% در pH 8 ميگذاريم تا رنگ Fluorescein isothiocyanate بمدت طولاني تر و عميق تر اثر گذارد . اسلايدهاي تهيه شده تا 72 ساعت در دماي 4 درجه د رتاريكي قابل نگهداري و استفاده ميباشند. بدنبال عفونت با اسپروزئيت ها آنتي بادي هاي توليد شده بر عليه T.parva و T.annulate ابتدا” بين روزهاي دهم تا 14 برعليه شيزونت ودر بين روزهاي 15-21 بر عليه پيروپلاسم قابل تشخيص مي باشند. پادتنها بعد از بهبودي ناپديد مي شوند ووابسته به فاكتورهاي متفاوتي از جمله وضعيت ناقل،  فاصله مابين درمان، درمعرض قرار گرفتن و تماس دوباره با كنه آلوده تغيير مي كنند. معمولا“  4 تا 6 ماه بعد از آلودگي آنتي بادي پائين مي آيد ( در صورتيكه تماس دوباره پيش نيايد).

بدنبال آلودگي با T.mutans آنتي بادي در روزهاي دهم تا 15 قابل اندازه گيري بوده و بعد از 12-24 ماه پائين ميآيد.

تگ ها اشتراک گذاری مقاله قبلی مقاله بعدی پاسخ دادن لطفا دیدگاه خود را وارد کنید لطفا اسم خود را وارد کنید. ایمیل وارد شده اشتباه می باشد. لطفا ایمیل آدرس خود را وارد کنید.

9  ×   = 

© تمامی حقوق مادی و معنوی این سایت متعلق است به گروه سایت دامپزشکان می باشد و هرگونه کپی برداری منجر به پیگرد قانونی می شود.